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申 请 号:CN201910444452

专利名称:一种抗AMH特异性抗体的制备方法以及该抗体在检测AMH试剂盒中的应用

专利权人:郑州伊美诺生物技术有限公司

交易方式:协议

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专利基本信息:

名称:一种抗AMH特异性抗体的制备方法以及该抗体在检测AMH试剂盒中的应用
申请号:CN201910444452
申请日期:2019-05-27
申请人:郑州伊美诺生物技术有限公司
发明人:代春迎; 侯鹏云; 胡晓彤; 张跃峰; 张创; 赵巧辉; 李桂林; 付光宇; 吴学炜; 杨增利
地址:450016 河南省郑州市经济技术开发区第六大街133号1号厂房
主分类号:C07K16/26
分类号:C07K16/26; G01N33/74; G01N33/577
主权项:1.一种抗AMH特异性抗体的制备方法,其特征在于:包括下述步骤: 第一步,制备AMH重组蛋白构建包含AMH编码序列的pCMV3表达质粒,转染CHO细胞,收集细胞培养上清,通过Ni柱纯化得到纯化后的AMH重组蛋白备用; 第二步,制备抗AMH特异性抗体用第一步制备的AMH重组蛋白作为免疫原对Balb/c小鼠进行免疫,ELISA间接法检测小鼠血清效价超过1/8K后,取免疫小鼠脾脏与小鼠骨髓瘤细胞NS1融合,杂交瘤细胞通过ELISA间接法进行3次亚克隆筛选,得到分泌抗AMH的单克隆杂交瘤细胞;将杂交瘤细胞注射小鼠腹腔,收集腹水经过纯化后得到抗AMH的特异性单克隆抗体。
摘要:本发明公开了一种抗AMH特异性抗体的制备方法, 首先构建包含AMH编码序列的pCMV3表达质粒,转染CHO细胞,收集细胞培养上清,通过Ni柱纯化得到纯化后的AMH重组蛋白备用;用制备的AMH重组蛋白作为免疫原对Balb/c小鼠进行免疫,ELISA间接法检测小鼠血清效价超过1/8K后,取免疫小鼠脾脏与小鼠骨髓瘤细胞NS1融合,杂交瘤细胞通过ELISA间接法进行3次亚克隆筛选,得到分泌抗AMH的单克隆杂交瘤细胞;将杂交瘤细胞注射小鼠腹腔,收集腹水经过纯化后得到抗AMH的特异性单克隆抗体。本发明制备方法简单,制备得到的抗体特异性强,应用在检测人AMH含量的试剂盒中,检测结果几乎不受动物血清的影响,可为医生的临床诊断和治疗提供可靠的依据。

专利详细信息:



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公开
法律状态公告日:2019-09-10
法律状态:公开
描述信息:公开
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2019-09-10 公开 js/timeglider/js/timeglider/icons/verticalLineGray.png 50
2019-10-08 实质审查的生效 js/timeglider/js/timeglider/icons/verticalLineGray.png 50

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