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申 请 号:CN201310629710
专利名称:基于转录组测序开发绿豆SSR引物的方法
专利权人:中国农业科学院作物科学研究所
交易方式:协议
参考价格: 面议
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名称: | 基于转录组测序开发绿豆SSR引物的方法 |
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申请号: | CN201310629710 |
申请日期: | 2013-11-29 |
申请人: | 中国农业科学院作物科学研究所 |
发明人: | 陈红霖; 程须珍; 王素华; 王丽侠 |
地址: | 100081 北京市海淀区学院南路80号,资源北楼402 |
主分类号: | C12Q1/68 |
分类号: | C12Q1/68; C12N15/11 |
主权项: | 一种基于转录组测序开发绿豆SSR引物的方法,其特征在于,包括以下步骤:1)构建转录组文库:提取绿豆叶片总RNA,分离出mRNA,反转录并合成双链cDNA,纯化cDNA,在cDNA末端添加腺嘌呤核苷并连接测序接头,然后通过琼脂糖凝胶电泳回收200-700bp片段,对回收片段进行PCR扩增,即构建得到转录组文库;2)对上述转录组文库进行测序,利用软件Trinity将测序序列拼接成一个完整的转录组,取每条基因中最长的转录本作为Unigene,并对Unigene序列进行生物信息学分析;3)采用软件MISA1.0对上述Unigene进行SSR检测;4)采用软件Primer3进行SSR引物设计,并鉴定SSR引物的多态性。 |
摘要: | 本发明提供一种基于转录组测序开发绿豆SSR引物的方法,包括:获得绿豆全基因组转录本的集合,形成序列数据库;用Trinity将测序序列拼接成一个转录组,取每条基因中最长的转录本作为Unigene;Unigene序列生物信息学分析;采用MISA1.0对Unigene进行SSR检测;用Primer3进行SSR引物设计,并进行SSR引物多态性鉴定。应用本方法成功设计了13134对SSR引物,从中随机选取50对引物对来源于不同国家共8份绿豆DNA进行验证,其中多态引物共有32对,利用这32对SSR引物可以区分不同地理来源的绿豆材料。本发明方法方便、快捷、准确且成本低廉,为绿豆SSR引物开发提供了新思路。 |
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2014-03-19 | 公开 | js/timeglider/js/timeglider/icons/verticalLineGray.png | 50 | |||||
2014-04-16 | 实质审查的生效 | js/timeglider/js/timeglider/icons/verticalLineGray.png | 50 | |||||
2015-03-18 | 授权 | js/timeglider/js/timeglider/icons/verticalLineGray.png | 50 |
:( FILE: /home/ftp/1520/ipa361_com-20150420-MrH/ipa361.com/mapi/Application/Home/Controller/PraiseController.class.php LINE: 56 #0 /home/ftp/1520/ipa361_com-20150420-MrH/ipa361.com/mapi/Application/Home/Controller/PraiseController.class.php(56): Yar_Client->__call('theme_bar', Array) ThinkPHP3.2.3 { Fast & Simple OOP PHP Framework } -- [ WE CAN DO IT JUST THINK ]curl exec failed 'Couldn't connect to server'
错误位置
TRACE
#1 /home/ftp/1520/ipa361_com-20150420-MrH/ipa361.com/mapi/Application/Home/Controller/PraiseController.class.php(56): Yar_Client->theme_bar('get_bar_id', Array)
#2 [internal function]: Home\Controller\PraiseController->get_bar_id_by_from_id()
#3 /home/ftp/1520/ipa361_com-20150420-MrH/ipa361.com/mapi/ThinkPHP/Library/Think/App.class.php(173): ReflectionMethod->invoke(Object(Home\Controller\PraiseController))
#4 /home/ftp/1520/ipa361_com-20150420-MrH/ipa361.com/mapi/ThinkPHP/Library/Think/App.class.php(110): Think\App::invokeAction(Object(Home\Controller\PraiseController), 'get_bar_id_by_f...')
#5 /home/ftp/1520/ipa361_com-20150420-MrH/ipa361.com/mapi/ThinkPHP/Library/Think/App.class.php(204): Think\App::exec()
#6 /home/ftp/1520/ipa361_com-20150420-MrH/ipa361.com/mapi/ThinkPHP/Library/Think/Think.class.php(120): Think\App::run()
#7 /home/ftp/1520/ipa361_com-20150420-MrH/ipa361.com/mapi/ThinkPHP/ThinkPHP.php(97): Think\Think::start()
#8 /home/ftp/1520/ipa361_com-20150420-MrH/ipa361.com/mapi/index.php(27): require('/home/ftp/1520/...')
#9 {main}