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申 请 号:CN201310629710

专利名称:基于转录组测序开发绿豆SSR引物的方法

专利权人:中国农业科学院作物科学研究所

交易方式:协议

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专利基本信息:

名称:基于转录组测序开发绿豆SSR引物的方法
申请号:CN201310629710
申请日期:2013-11-29
申请人:中国农业科学院作物科学研究所
发明人:陈红霖; 程须珍; 王素华; 王丽侠
地址:100081 北京市海淀区学院南路80号,资源北楼402
主分类号:C12Q1/68
分类号:C12Q1/68; C12N15/11
主权项:一种基于转录组测序开发绿豆SSR引物的方法,其特征在于,包括以下步骤:1)构建转录组文库:提取绿豆叶片总RNA,分离出mRNA,反转录并合成双链cDNA,纯化cDNA,在cDNA末端添加腺嘌呤核苷并连接测序接头,然后通过琼脂糖凝胶电泳回收200-700bp片段,对回收片段进行PCR扩增,即构建得到转录组文库;2)对上述转录组文库进行测序,利用软件Trinity将测序序列拼接成一个完整的转录组,取每条基因中最长的转录本作为Unigene,并对Unigene序列进行生物信息学分析;3)采用软件MISA1.0对上述Unigene进行SSR检测;4)采用软件Primer3进行SSR引物设计,并鉴定SSR引物的多态性。
摘要:本发明提供一种基于转录组测序开发绿豆SSR引物的方法,包括:获得绿豆全基因组转录本的集合,形成序列数据库;用Trinity将测序序列拼接成一个转录组,取每条基因中最长的转录本作为Unigene;Unigene序列生物信息学分析;采用MISA1.0对Unigene进行SSR检测;用Primer3进行SSR引物设计,并进行SSR引物多态性鉴定。应用本方法成功设计了13134对SSR引物,从中随机选取50对引物对来源于不同国家共8份绿豆DNA进行验证,其中多态引物共有32对,利用这32对SSR引物可以区分不同地理来源的绿豆材料。本发明方法方便、快捷、准确且成本低廉,为绿豆SSR引物开发提供了新思路。

专利详细信息:



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公开
法律状态公告日:2014-03-19
法律状态:公开
描述信息:公开
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2014-03-19 公开 js/timeglider/js/timeglider/icons/verticalLineGray.png 50
2014-04-16 实质审查的生效 js/timeglider/js/timeglider/icons/verticalLineGray.png 50
2015-03-18 授权 js/timeglider/js/timeglider/icons/verticalLineGray.png 50

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